1、检测目的基因是否转录通常采用分子杂交的方法。基因表达分为转录及翻译两阶段，转录是以DNA（基因）为模板生成mRNA的过程，翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程，检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。
2、用特异性引物和抗体分别检测其mRNA和蛋白的含量即可知道是否进行转录和翻译。
3、基因转录：是起调控作用的反式作用因子。转录因子是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。翻译：是中心法则中一个不可或缺的过程，对生物机体的性能有着不可或缺的作用。基因表达：利用基因表达来合成生命的大分子。
4、原理：转录是以一条DNA链为模板，合成出一条mRNA的过程。所以，检测某一基因在特定条件下是否转录，可以提取样品的mRNA，反转录成cDNA，然后用扩增该基因的PCR引物扩增，如果有条带就是说明转录，没有条带就是不转录。
5、将基因序列转换成氨基酸序列，再将氨基酸序列拿到NCBI上用BLAST比对，就可以查到其转录翻译形成的蛋白质了。基因就控制了这种蛋白质的合成，从而通过蛋白质的功能，可以给出此基因的功能。
6、基因的转录与翻译相同点不多，不同点挺多。其相同点有：都是以DNA上携带的基因为基础的，都是基因中脱氧核糖核苷酸序列的直接反映。都可以发生在细胞生长的任何时期。不同点有：转录是蛋白质合成的基础，翻译是蛋白质合成的直接过程。转录是以DNA为模板，翻译是以mRNA为模板。
和62肯定是有区别的。你要去NCBI上查65的序列然后有相关软件设计你需要的基因片段的引物，当然软件设计的引物是很多的，并一定都有效，所以需要你自己筛选。一般都是自己设计好引物，把序列发给公司让人家合成。
通过提取细胞或组织的蛋白质，使用特定的抗体标记NF-κB蛋白质或其下游效应蛋白质，使用免疫印迹技术检测蛋白质的表达水平。荧光染色和激光共聚焦显微镜：通过使用荧光探针或荧光标记的抗体，可以直接观察细胞内NF-κB的定位和活性。
方法不同 普通pcr引物设计：引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。
TNFα可抑制正常人和硬皮病患者皮肤成纤维细胞中TGF-β诱导的CTGF表达和胶原合成，但对硬皮病成纤维细胞CTGF的基础表达却无抑制作用，有人证实TNFa对CTGF的抑制作用通过p38激酶和ras/MEK/ERK途径实现，能被核因子B（NF-kB）抑制剂阻断，与三磷酸肌醇无关。
合理分区：实验室应分为独立的功能区，通常包括试剂储存和准备区、样本前处理区、样本制备区、文库制备区、杂交捕获区/多重PCR区域（第一扩增区）、文库扩增区（第二扩增区）、测序区以及数据分析与存储区等 。
不同功能的工作区应是分隔独立的，各工作区有明显的标志，不能直通，如果紧密相连，需安装物品传递窗。前两区为扩增前区，后两区为扩增后区，扩增前区与扩增后区应严格分开。
PCR实验室分为四个区域，不同的工作区域使用不同的工作服。离开各工作区域时，不得将工作服带出。各实验室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入。
VOLAB专业可共用建筑物，但应自成一区，宜设在一端或一侧，与建筑物其他部分可相通。宜将实验室划分为三区，即污染区、半污染区和清洁区（建筑面积以不小于40平方米为宜）。实验区应设洗手池，宜采用非手动水龙头；在靠近出口处也应设洗手池。
pcr实验室没有太严格等洁净度要求，可根据多方面因素全面考虑。基本功能介绍：准备区、实验所需试剂的准备工作，分装等，由传递窗运送至制备区，严谨走人员通道。制备区、主要进行样品等保存，rna\dna的提取、贮存和其加入至扩增反应管和测定rna\dna的合成。
核酸实验室设计基本要求SICOLAB 试剂准备区：是PCR实验室中最为“洁净”的区域，它不应有任何核酸成分的存在，否则将严重影响检测结果的准确性。标本的制备应在生物安全柜内进行。主要设备：冰箱、低温冰箱、混匀器、微量加样器（0.2-1000ul）、移动紫外灯。
核酸检测实验室应至少分为4个区域。它们分别是：试剂配制区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区。核酸检测实验室原则上为试剂准备区，样品制备区，扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域，并设有走廊，各工作区域应设缓冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。
环境控制：实验室应配备温度、湿度控制设备，并根据设备要求设定适宜的环境参数，如Illumina测序平台要求温度约22℃，湿度30%-75%之间 。 安全与生物安全柜：样本处理区域应使用生物安全柜进行操作，以防止气溶胶污染 。
1、用于“未知基因”PCR的引物是随机引物吧，那样的话是没有办法知道片段大小的。最直接的办法是把PCR的产物送去克隆测序。如果你说的未知基因是已知的序列那么就根据PCR引物设计的基本原理来设计扩增片段引物，电泳检测就行。记得带个MARKER。
2、错配严重的在PCR之后会出现较小的杂带。还有就是引物自身会不会出现发夹（就是引物自己的局部会发生错配），两条引物会不会形成互配等等（这些都是不存在为最好的）。这两个会影响PCR产物的量，严重的会没有产物形成。
3、真核生物DNA里边是有非基因序列的，如果你不想要这些非基因序列，就用mRNA做模板，然后做反转录，得到cDNA， 再用PCR扩增（设计引物时要根据cDNA序列），得到的产物中间应该是不会有非基因序列的。关于反转录：http：//baike.baidu.com/view/54041htm如果要和模板一样，需要用保守的DNA聚合酶，一般的Taq酶会有错配。
4、回答同1L LZ可以像1L说的看看是不是同一物种的同一基因，是的话那就随便那对都能用，之所以会不一样可能是由于扩增产物的长度不一样而引起的。同一个基因用Primer设计的话也是可以设计出好几对引物的，LZ就像1L说的那样看看是不是同一物种的同一基因，是的话就随便拿一对用就OK了。
5、获取目的基因，要知道转录版本全长，然后设计上下游引物。检测目的基因表达，只要设计上下游引物，扩增基因的100--200个碱基就可以了。或者你的提问本身有问题，基因碱基是互补的，知道一条，就可以设计上下游引物。
6、可以根据其其近缘种的保守基因序列设计，但通常都很难得到全长。要得到基因全长，可先得到中间片段序列，然后RACE或者Inverse PCR都可以尝试下。如果近缘种序列同源性很高，还可以参考其他物种序列，设计几对引物，直接扩增基因全长。
